《農(nóng)產(chǎn)品中黃曲霉毒素的時(shí)間分辨熒光免疫層析快速檢測技術(shù)研究.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。

1、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)2014，47(18)：3668—3674ScientiaAgriculmraSinicadoi：10．3864~．issn．0578—1752．2014．18．014農(nóng)產(chǎn)品中黃曲霉毒素的時(shí)間分辨熒光免疫層析快速檢測技術(shù)研究張兆威，李培武，張奇，丁小霞(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院油料作物研究所／農(nóng)業(yè)部生物毒素檢測重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室／農(nóng)業(yè)部油料作物生物學(xué)與遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)薊農(nóng)業(yè)部油料產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估實(shí)驗(yàn)室(武漢)／農(nóng)業(yè)部油料及制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測試中心，武漢430062)摘要：【目的l黃曲霉毒素嚴(yán)重污染農(nóng)產(chǎn)品，威脅人畜生命健康，是政府重視、社會(huì)關(guān)注的一大焦點(diǎn)問題，因此亟需研究

2、建立黃曲霉毒素高靈敏高快速檢測方法。目前已研制出高特異性高靈敏度黃曲霉毒素單克隆抗體，本研究旨在應(yīng)用該抗體，建立黃曲霉毒素時(shí)間分辨熒光免疫層析快速檢測技術(shù)，為農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)管、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供技術(shù)支持。【方法l本研究通過將黃曲霉毒素抗體與乳膠銪進(jìn)行偶聯(lián)標(biāo)記，利用自主研制的黃曲霉毒素時(shí)間分辨熒光免疫層析試紙條進(jìn)行黃曲霉毒素檢測，通過檢測線T信號(hào)值與質(zhì)控線c信號(hào)值的比值和標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的自然對(duì)數(shù)值實(shí)現(xiàn)定量。針對(duì)花生、稻米、植物油等不同農(nóng)產(chǎn)品，研究建立樣品粉碎均質(zhì)提取一體化技術(shù)。對(duì)銪標(biāo)記時(shí)間分辨熒光免疫層析檢測技術(shù)進(jìn)行方法學(xué)考核，以花生、稻米、植物油等為例，進(jìn)行實(shí)際樣品檢測，并與H

3、PLC法進(jìn)行結(jié)果比對(duì)?！窘Y(jié)果l在花生、稻米、植物油等農(nóng)產(chǎn)品實(shí)際樣品檢測中，本研究建立的時(shí)間分辨熒光免疫層析檢測技術(shù)檢測黃曲霉毒素B。得到檢測限均為0．3ug·kg～，線性范圍分別為0．8—25、0．8—15和0．8—3O·kg～。上述3種農(nóng)產(chǎn)品對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程分別為y=O．238x+0．654(=O．992)、y=0．3210．811(=O．990)和y=0．146x+0．173(R=0．993)，標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0．024、0．039和0．021。該方法的批內(nèi)準(zhǔn)確度和精密度添加回收試驗(yàn)結(jié)果表明，添加回收率在81．0％一113．O％，變異系數(shù)在7．2％一14．2

4、％；批間準(zhǔn)確度和精密度試驗(yàn)結(jié)果顯示，添加回收率在75．8％一114．9％，變異系數(shù)在7．7％一15．3％。說明該檢測技術(shù)批內(nèi)、批間均具有良好的準(zhǔn)確度和精密度。該方法與HPLC法檢測結(jié)果相比，相對(duì)誤差小于1O％，說明黃曲霉毒素時(shí)間分辨熒光免疫層析技術(shù)與行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法檢測結(jié)果具有良好的一致性?！窘Y(jié)論】時(shí)間分辨熒光免疫層析檢測技術(shù)靈敏度高、線性范圍寬，重復(fù)性和穩(wěn)定性好，是一種適合中國國情的實(shí)用快速檢測技術(shù)，具有廣闊的應(yīng)用前景。關(guān)鍵詞：黃曲霉毒素；時(shí)間分辨熒光免疫層析；農(nóng)產(chǎn)品；快速檢測StudyonTime—ResolvedFluorescenceImmunochromatog

5、raphyforAfaltoxinDeterminationinAgriculturalProductZHANGZhao—wei，LIPei-WU，ZHANGQi，DINGXiao—xia(OilCropsResearchInstitute，ChineseAcademyofAgriculturalSciences~KeyLaboratoryofDetectionforMycotoxins，MinistryofAgriculture~KeyLaboratoryofBiologyandGeneticImprovementofOilCrops，MinistryofAgric

6、ulture~LaboratoryofRiskAssessmentfo，OilseedsProducts(Wuhan)，Min&tryofAgriculture~QualityInspectionandTestCenterforOilseedsProducts，Min&tryofAgriculture,Wuhan430062)Abstract：[Objective]Aflatoxincontaminatesagriculturalproductseverely,threatenshealthandlifeofpeopleandlivestocks．Itisoneoft

7、hemajorfocusissuesandattractsbothgovernmentalandsocialconcerns．Thus，itisrequiredtoestablisharapidandsensitivedeterminationmethodforaflatoxin．Highspecificandsensitivemonoclonalantibodyagainstaflatoxinhasbeendeveloped．收稿日期：2014—03．25；接受日期：2014—05．27基金項(xiàng)目：國家科技支撐計(jì)劃(20l2BABl9BO9)、國家公