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《各公司哺乳細胞表達載體比較.doc》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內容在工程資料-天天文庫。
1、Invitrogen公司pcDNA=CMV;pEF=EF-1a;pUb=Ub;-TOPO=TOPO克隆,/Gateway;-His/V5/myctagged;抗性Neo/Zeo/Hyg/Bsd載體名稱分子量啟動子增強子內含子RNA聚合酶N端TagC端Tag特殊序列中止序列polyA復制起始抗性篩選克隆檢測方法純化表達方式備注pcDNA5/FRT/V5-His-TOPO5.2CMV///V5,6His有BGHpUCHygTOPO抗V5抗體檢測Ni形成相同基因的細胞;必須和Fip重組表達載體pOG44共轉染Fip細胞pEF5/FRT/V5-DST7.5EF-1aV5GatewaypEF5/
2、FRT/V5-D-TOPO5.8TOPOpSecTag/FRT/V5-His-TOPO5.2V5,6HisIgk信號,分泌表達融合蛋白NipcDNA5/FRTCMV酶切pcDNA3.2/V5-GW/D-TOPOCMV//T7V5attB1,attB2/TKpUCNeo穩(wěn)定pcDNA6.2/V5-GW/D-TOPOBsdpcDNA3.2-DESTCMV//T7V5attR1,attR2;ccdB;CmR/TKf1,pUC,SV40Neo瞬時/穩(wěn)定pcDNA6.2-DESTBsdpcDNA3.1/nV5-DEST7.1V5attR1,attR2;ccdB;CmR;TEV用于切割V5抗原BG
3、HNeopcDNA3.2-DEST407.1V5,6HisattR1,attR2;ccdB;CmRpUCNipDEST267.66HisSV40f1,pUC,SV40NipDEST278.1GSTGSTpcDNA3.1-E,pcDNA4/HisMAX-E載體在原來基礎上增加了-EEcho無需酶切,連接即可完成基因克隆pcDNA4/HisMax5.3CMVSP163/T76His,XpressEK/BGHf1,pUC,SV40ZeoXpressNi瞬時/穩(wěn)定有多種ORFpcDNA4/HisMax-TOPO5.3TOPOpcDNA3.1[+/-]5.4CMVCMV/T7//BGHf1,pU
4、C,SV40Neo瞬時/穩(wěn)定無tag的載體pcDNA3.1/Zeo[+/-]5/ZeopcDNA3.1/Hyg[+/-]5.6HygpcDNA3.1,4,6/HisA,B,C5.5-5.0CMVCMV/T76His,XpressEK/BGHf1,pUC,SV403.1=Neo,瞬時/穩(wěn)定共22個載體,分別具有不同啟動子、抗性、抗原tag4=Zeo,6=BsdpcDNA3.1,4,6/V5-HisA,B,C5.5-5.0V5,6His有pcDNA3.1,4,6/myc-HisA,B,C5.5-5.1myc,6HispEF1,4,6/HisA,B,CEF-1aEF-1a同上瞬時/穩(wěn)定pEF
5、1,4,6/V5-HisA,B,CpEF1,4,6/myc-HisA,B,C瞬時/穩(wěn)定pUB/V5-HisA,B,CUbpRc/CMV25.5CMV/T7///BGHf1,ColE1,SV40Neo穩(wěn)定MCS處有2個BstXI酶切位點pRc/RSV5.2RSVLTR/////BGHf1,ColE1,SV40NeopZeoSV2(+/-)3.5SV40/T7代替T3///BGHpA代替SV40pA,避免與Zeo下游的SV40pA混淆重排f1,ColE1Zeo瞬時/穩(wěn)定增加了轉化和轉染效率,與pcDNA3.1相同的MCS,較pZeoSV去除了Sp6啟動子pBudCE44.6CMV/EF-1
6、a///V5-His/myc-HisSV40/BGHpUCZeo穩(wěn)定同時表達兩個目的基因pCMV/Zeo,pSV40/Zeo和pCMV/Bsd,pEF/Bsd,pUB/Bsd分別是用于在一新載體上構建Zeo/Bsd抗性Xpress-tagged表達載體融合部分可切;V5/BioEase/His/myc-His/Xpress-tagged表達載體在westernBlot實驗時低背景;myc-His-tagged的表達載體可有效檢測的常用抗原,可免疫沉淀;His-tagged的表達載體可有效免疫沉淀;BioEase-tagged的表達載體可有效檢測的常用抗原,可免疫沉淀Stratagene
7、公司載體名稱分子量啟動子增強子內含子RNA聚合酶N端TagC端Tag特殊序列中止序列polyA復制起始抗性篩選克隆檢測方法純化表達方式備注pExchange-1corevector3.6CMV早期//T7,T3kozak有SV40f1,colE1,SV40無WB,免疫沉淀,免疫熒光,pulldown實驗,親和層析;核酸探針,功能篩選,抗體篩選pExchange-24.3FLAG,c-myc有2套MCS+終止子pExchange-3A,3B,3C