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    曼氏無(wú)針烏賊peroxiredoxin4的克隆與表達(dá)【開(kāi)題報(bào)告】

    曼氏無(wú)針烏賊peroxiredoxin4的克隆與表達(dá)【開(kāi)題報(bào)告】

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    1、畢業(yè)論文開(kāi)題報(bào)告生物工程曼氏無(wú)針烏賊peroxiredoxin4的克隆與表達(dá)一、選題的背景與意義Peroxiredoxin4是新近發(fā)現(xiàn)的抗氧化酶家族成員中的一個(gè)亞類,具有獨(dú)特的催化特性和可逆性過(guò)氧化循環(huán),廣泛存在于各種生物體內(nèi)。近年來(lái)Peroxiredoxin4研究發(fā)展迅速,Peroxiredoxin4的抗氧化性以及Peroxiredoxin4在不同生物組織中的分布廣泛性決定了它在動(dòng)植物以及微生物體內(nèi)有重要而特殊的生物學(xué)功能。它們?cè)诳茖W(xué)的多個(gè)領(lǐng)域中均有重要應(yīng)用價(jià)值,在不同的生物組織中作用機(jī)制各不相同。Peroxiredoxin4在細(xì)胞內(nèi)主要起抗氧化

    2、和調(diào)節(jié)過(guò)氧化氫介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)作用;參與細(xì)胞的增殖與分化;增強(qiáng)NK細(xì)胞的活性;保護(hù)自由基敏感蛋白;參與血紅素的代謝還參與細(xì)胞周期進(jìn)程以及發(fā)揮分子伴侶作用。在生物養(yǎng)殖、生物工程、生物制藥、生理活動(dòng)調(diào)控、疾病防治、研究寄生性原蟲(chóng)疫苗等方面展示出廣闊的應(yīng)用前景。而關(guān)于曼氏無(wú)針烏賊的peroxiredoxin4的作用目前尚不明確,更沒(méi)有人做過(guò)關(guān)于它的研究。所以對(duì)曼氏無(wú)針烏賊peroxiredoxin4進(jìn)行克隆與表達(dá),研究它的特殊生物學(xué)功能具有重大的意義。二、研究的基本內(nèi)容與擬解決的主要問(wèn)題:1.克隆peroxiredoxin4cDNA全長(zhǎng)及其氨基酸序列分析2

    3、.檢測(cè)peroxiredoxin4在不同組織中表達(dá)情況和分析3.進(jìn)行peroxiredoxin4關(guān)鍵結(jié)構(gòu)域的重組及其電泳檢測(cè)4.不同環(huán)境因子影響后的表達(dá)情況5.所得到重組蛋白的活性檢測(cè)三、研究的方法與技術(shù)路線:1.Peroxiredoxin4全長(zhǎng)cDNA序列的克隆與獲得↓2.基因的核苷酸分析和氨基酸序列分析↓3.重組表達(dá)載體的構(gòu)建及轉(zhuǎn)化宿主菌↓4.重組蛋白的誘導(dǎo)表達(dá)↓5.表達(dá)產(chǎn)物的初步分析↓6.重組蛋白的電泳檢測(cè)↓7.含有重組質(zhì)粒的宿主菌的擴(kuò)大培養(yǎng)和分離純化↓8.重組蛋白的濃度和活性測(cè)定二、研究的總體安排與進(jìn)度:2010.10-2010.11畢業(yè)論

    4、文選題2010.11-2010.12進(jìn)行文獻(xiàn)查閱和資料收集,制定具體研究計(jì)劃和試驗(yàn)方案。2010.12-2010.12撰寫綜述和開(kāi)題報(bào)告及任務(wù)書(shū)。2010.12開(kāi)題報(bào)告答辯2011.1-2011.2實(shí)地采樣、試驗(yàn)研究、數(shù)據(jù)處理和分析2011.2-2011.3完成外文翻譯2011.3-2011.4論文撰寫2011.4-2011.5提交并答辯五、主要參考文獻(xiàn):[1]章波,向渝梅,白云.抗氧化蛋白peroxiredoxin家族研究進(jìn)展[J].生理科學(xué)進(jìn)展,2004,35(4):352-355.[2]RheeSG,KangSW,ChangTS,etal.P

    5、eroxiredoxin,anovelfamilyofperoxidase[J].IUBMBLife,2001,52(2):35-41.[3]史河秀,王世鄂.2-Cysperoxiredoxins的研究進(jìn)展[J].解剖學(xué)研究,2007,29(5):380-383.[4]MizusawaH,Ishii,T,BannaiS.PeroxiredoxinI(macrophage23kDastressprotein)ishighlyandwidelyexpreasedintheratnervoussystem[J].NeurosciLett,2000,283

    6、(4):57-60.[5]ImmenschuhS,Baumgart-VogtE,TanM,etal.Differentialcelluarandsubcellularlocalizationofhemeblindingprotein23/peroxiredoxinIandhemeoxygenaselinratliver[J].JHistochemCytochem,2003,51(8):1621-1631.[6]張成林,李建遠(yuǎn).抗氧化蛋白peroxiredoxin6研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)研究雜志,2010,39(6):121-124.[7]王蔚,劉蕓等

    7、.過(guò)氧化物氧化還原蛋白家族的功能與調(diào)節(jié)機(jī)制[J].生命的化學(xué),2010,2(4)184-188.[8]JangHH,LeeKO,ChiYH,etal.Twoenzymesinone,twoyeastperoxiredoxinsdisplayoxidativestressdependentswithingfromaperoxidasetoamolecularchaperonefunction[J].Cell,2004,117(5):625-635.[9]JangHH,KimSY,ParkSK,etal.Phosphorylationandconcom

    8、itantstructuralchangesinhuman2-CysperoxiredoxinisotypeIdiffer

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