《大鼠肝移植急性排斥反應(yīng)相關(guān)基因的基因芯片研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文大鼠肝移植急性排斥反應(yīng)相關(guān)基因的基因芯片研究姓名：李智宇申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：黃潔夫2003.5.1中山大學(xué)博士學(xué)位論文中文摘要一————————————————————————————————————一大鼠肝移植急性排斥反應(yīng)相關(guān)基因的基因芯片研究中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院器官移植外科專業(yè)：外科學(xué)博士研究生：李智宇博士生導(dǎo)師：黃沽夫摘要目的：了解肝移植急性排斥反應(yīng)發(fā)生的主要效應(yīng)細(xì)r抱--T淋巴細(xì)胞和靶器官一肝組織的基因表達(dá)譜的變化；從基因水平探討肝移植急性排斥反應(yīng)發(fā)生的細(xì)胞和分子機(jī)制，發(fā)現(xiàn)新的相關(guān)基因以及急性排斥反應(yīng)發(fā)生過程中的新途徑，從而為提高肝移

2、植術(shù)后急性排斥反應(yīng)的早期診斷水平，尋找阻斷急性排斥反應(yīng)發(fā)生的新作用位點(diǎn)，為提高肝移植的療效提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。r／方法：＼用袖套技術(shù)建立穩(wěn)定的大鼠原位肝移植模型，其中實(shí)驗(yàn)組為封閉群Wistar(n=5)為供體，封閉群Sprague-Dawley(SD)(n=5)為受體，建立急性排斥反應(yīng)模型；對(duì)照組為同品系、與排斥組受體同窩生封閉群SD(n=5)一SD(n=5)的非排斥組。在肝移植術(shù)后第五天處死大鼠，分別采取外周血和肝組織。外周血血清檢測(cè)ALT、LDH；利用梯度離心和免疫磁珠方法分離、提純T淋巴細(xì)胞，用Trizol液抽提總RNA，純化為mRNA后，用線性擴(kuò)增的方法擴(kuò)增以滿足芯片雜交實(shí)驗(yàn)需求

3、量；肝組織除一部分送病理組織學(xué)檢查外，其余部分液氮速凍保存，用Trizol液抽提總RNA，純化為mRNA后備芯片雜交實(shí)驗(yàn)。排斥組、對(duì)照組的mRNA逆轉(zhuǎn)錄為eDNA，分別用熒光素Cy5、Cy3標(biāo)記后與具有4，096個(gè)大鼠eDNA文庫基因片段的基因芯片進(jìn)行雜交，掃描芯片雜交結(jié)果，根據(jù)排斥組和對(duì)照組Cy5、Cy3熒光強(qiáng)度的比值，篩選出兩組間差異表達(dá)的基因，并進(jìn)行相應(yīng)的生物信息學(xué)分析。中山大學(xué)博士學(xué)位論文中文摘要結(jié)果：術(shù)后病理檢查結(jié)果等證實(shí)了肝移植急性排斥反應(yīng)模型的穩(wěn)定建立；基因芯片篩選出差異表達(dá)的基因近120條，其中包括：編碼急性排斥反應(yīng)中與抗原識(shí)別有關(guān)的MHC—II類分子a、B、Y多肽

4、鏈和CD3分子6多肽鏈的基因：與T淋巴細(xì)胞活化的早期磷酸化事件、細(xì)胞內(nèi)第二信使信號(hào)傳遞有關(guān)的關(guān)鍵酶磷酸酪氨酸激酶、多聚磷酸肌醇磷酸酯酶、蛋白激酶C相關(guān)基因；與核酸信號(hào)傳導(dǎo)、激活、轉(zhuǎn)錄、翻譯調(diào)控有關(guān)的基因；細(xì)胞因子表皮生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子一8、干擾素調(diào)節(jié)因子l、補(bǔ)體因子l、一氧化氮代謝酶等相關(guān)基因；y—GGT、LDH、細(xì)胞色素P450、黃嘌呤脫氫酶、三磷酸腺苷酶、延胡索酰乙酰乙酸酶等代謝酶類相關(guān)基因；n-l急性期蛋白抑制因子3、分泌型白細(xì)胞蛋白酶抑制物炎癥期蛋白抑制物相關(guān)基因；以及與凝血、纖溶系統(tǒng)調(diào)節(jié)相關(guān)的編碼激肽釋放酶、CD36的基因等多條基因片段。1結(jié)論：。肝移植術(shù)后急性排斥反

5、應(yīng)作用機(jī)制涉及多個(gè)基因，是多個(gè)基因協(xié)同作用的網(wǎng)絡(luò)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示肝移植術(shù)后急性排斥反應(yīng)發(fā)生時(shí)基因表達(dá)譜的概貌和所涉及的相關(guān)基因，為探索肝移植急性排斥反應(yīng)發(fā)生的細(xì)胞和分子機(jī)制提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。同時(shí)也證實(shí)了基因芯片技術(shù)的高效、穩(wěn)定、可靠性?！娟P(guān)鍵詞】肝移植急性排斥反應(yīng)基因芯片T淋巴細(xì)胞II中山大學(xué)博士學(xué)位論文英文摘要———————————————————————————一——————————————————————————————————一ABSTRACTGenedifferentialexpressionanalysisofacuterejectioninratafterlivertr

6、ansplantationbyeDNAmicroarrayMajor：GeneralSurgeryName：LiZhiyuSupervisor：Prof．HuangJiefuObjectiveTheaimofthisstudywastoinvestigatethegeneexpressionpatternoftheTlymphocyteandliverallograftasmajoreffectivecellandtargettissue；Toexplorethecellularmadmolecularmechanismofacuterejectionafterlivertrans

7、plantationaswellastofindnovelrelatedgenesandnewpathwayoftheoccurrenceoftheacuterejection．Therefore，wecanprovideexperimentalbasistoimprovethediagnosisandcurativeeffectduringearlyperiodofacuterejectionafterlivertransplantation．Materialsan