《DB23∕T 2374-2019 馬鈴薯胞囊線蟲田間調(diào)查技術(shù)規(guī)范.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。

1、ICS65.020.01B15DB23黑龍江省地方標(biāo)準(zhǔn)DB23/T2374—2019馬鈴薯胞囊線蟲田間調(diào)查技術(shù)規(guī)范2019-06-05發(fā)布2019-07-04實(shí)施黑龍江省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布DB23/T2374—2019前言本標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)GB/T1.1-2009的規(guī)則編寫。本標(biāo)準(zhǔn)由黑龍江省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出。本標(biāo)準(zhǔn)由黑龍江省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院馬鈴薯研究所。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：王文重、閔凡祥、胡林雙、高云飛、楊帥、魏琪、董學(xué)志、郭梅、宿飛飛。IDB23/T2374—2019馬鈴薯胞囊線蟲田間調(diào)查技術(shù)規(guī)程1范圍

2、本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了馬鈴薯胞囊線蟲田間調(diào)查的土壤取樣、分離、鑒定和結(jié)果判斷方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于馬鈴薯胞囊線蟲田間調(diào)查。2術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。2.1馬鈴薯胞囊線蟲馬鈴薯胞囊線蟲（potatocystnematode）包括馬鈴薯白線蟲（Globoderarostochiensis）和馬鈴薯金線蟲（Globoderapallida），屬于線蟲門（Nemata）、側(cè)尾腺綱（Secernentea）、墊刃目（Tylenchida）、異皮線蟲科（Heteroderidae）胞囊線蟲屬（Heterodera)，是馬鈴薯作物上最重要的病害之一。

3、對(duì)馬鈴薯根部、匍匐莖和塊莖造成傷害，癥狀主要表現(xiàn)為壞死，影響根部生長(zhǎng)，阻礙養(yǎng)分吸收，降低馬鈴薯產(chǎn)量和商品性。3取樣時(shí)間和方法3.1取樣時(shí)間每年在馬鈴薯播種前或收獲后，對(duì)馬鈴薯田土壤進(jìn)行隨機(jī)取樣。3.2調(diào)查地塊根據(jù)當(dāng)?shù)夭煌寥李愋瓦x擇有代表性的地塊進(jìn)行調(diào)查，每塊面積不得小于6670m2。3.3調(diào)查方法取樣時(shí)首先填寫表1。表1馬鈴薯胞囊線蟲田間調(diào)查表取樣地點(diǎn)取樣時(shí)間土壤類型填表人樣品編號(hào)調(diào)查面積（m2）前茬作物備注2DB23/T2374—2019取樣時(shí)先去除3cm~5cm的表土，然后利用土壤取樣器采集土壤樣品。由于馬鈴薯屬于壟作，所以取樣時(shí)

4、取距地面15cm~20cm的根部土壤。采用對(duì)角線五點(diǎn)取樣法，每個(gè)地塊可取5個(gè)取樣點(diǎn)，每個(gè)取樣點(diǎn)挖取根圍土作為1個(gè)小樣，每個(gè)小樣100g，然后將其混合成一個(gè)500g的混合樣。寫好標(biāo)簽，將樣品裝入取樣袋中。取樣時(shí)應(yīng)在土壤濕潤(rùn)時(shí)進(jìn)行，避免在土壤浸水時(shí)取樣。4分離和鑒定4.1樣品分離將取回的土壤樣品平鋪在干凈的淺瓷盤內(nèi)，自然干燥，去除土壤中的植物組織和粗砂等雜質(zhì)后，稱取100g土壤樣品備用。采用胞囊漂浮器分離法，分離時(shí)先將漂浮筒注滿水，將干燥后的100g土壤樣品放在上篩中，用強(qiáng)水流沖洗至全部土樣到漂浮筒內(nèi)，胞囊和草屑等浮在水面并溢出，經(jīng)環(huán)頸水槽

5、流到底篩中，用清水反復(fù)沖洗底篩，將底篩中的漂浮物倒在鋪有濾紙的漏斗中過濾，胞囊留在濾紙上。將晾干后的濾紙放于解剖鏡（8倍~10倍）下檢查，尋找胞囊。發(fā)現(xiàn)胞囊后用小毛刷收集胞囊。4.2樣品制作將胞囊線蟲的胞囊在培養(yǎng)皿內(nèi)浸泡24h，用尖頭鑷子將浸過的胞囊移至載玻片的水滴中，在體視顯微鏡（10倍~90倍）下用解剖刀切下胞囊后部的陰門椎部分。用挑針清除陰門椎內(nèi)附著物，用刀適當(dāng)整理陰門椎邊緣，使其高度不超過陰門窗區(qū)域?qū)挾鹊?0倍~15倍。將切下的陰門椎用40%的H2O2處理數(shù)分鐘，陰門椎依次移至載玻片的另一側(cè)的70%、95%、100%酒精液中脫水

6、。取適量固體狀的中性膠涂至凹槽的載玻片中，在酒精燈上加熱至膠溶化，將處理好的陰門埋于膠內(nèi)，注意操作時(shí)一定擺正陰門椎使其頂端向上，加入刷子毛作支撐物，蓋上蓋玻片，貼好標(biāo)簽。4.3樣品鑒定制作胞囊線蟲陰門錐玻片。最后生物顯微鏡（100倍~1000倍）下觀察胞囊和陰門錐形態(tài)特征。參見附錄A，對(duì)馬鈴薯胞囊線蟲形態(tài)進(jìn)行鑒定。5結(jié)果判斷符合4.3形態(tài)鑒定特征可判定是否分離到馬鈴薯金線蟲和馬鈴薯白線蟲，最后將結(jié)果匯入表2，判斷該地區(qū)是否存在馬鈴薯胞囊線蟲。表2馬鈴薯胞囊線蟲田間調(diào)查情況及結(jié)果表結(jié)果樣品編號(hào)取樣時(shí)間備注馬鈴薯金線蟲馬鈴薯白線蟲+：表示有

7、；—表示沒有A3DB23/T2374—2019附　錄　A（資料性附錄）馬鈴薯胞囊線蟲形態(tài)特征A.1馬鈴薯白線蟲學(xué)名：Globoderarostochiensis異名：Heteroderaschachtiirostochiensis；H.schachtiisolani；H.rostochiensis英文名：Potatocystnematode；Whitepotatocystnematode分類：線蟲動(dòng)物門（Nematoda），側(cè)尾腺口綱（Secernentea），墊刃目（Tylenchida），異皮線蟲科（Heteroderidae），球

8、胞囊屬（Globoder）。形態(tài)學(xué)特征：成熟雌蟲呈白色，死后變?yōu)楹稚⒂泄鉂?，有些種群在變成褐色之前要經(jīng)過3~4周的米黃色階段。蟲體近球形，有一個(gè)突出的頸和頭部；末端鈍圓、無陰門錐，角質(zhì)層有網(wǎng)狀花紋；頭架骨