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1、第一章前言克隆是英語單詞clone的音譯，clone源于希臘文klone,原意是指幼苗或嫩枝，以無性繁殖或營養(yǎng)繁殖的方式培育植物，如桿插和嫁接。如今，克隆是指生物體通過體細(xì)胞進(jìn)行的無性繁殖，以及由無性繁殖形成的基因型完全相同的后代個(gè)體組成的種群?？寺∫部梢岳斫鉃閺?fù)制、拷貝，就是從原型中產(chǎn)生出同樣的復(fù)制品，它的外表及遺傳基因與原型完全相同?？茖W(xué)從來都是一把雙刃劍。但是，某項(xiàng)科技進(jìn)步是否真正冇益于人類，關(guān)鍵在于人類如何對待和應(yīng)用它，而不能因?yàn)闀簠疾缓锨槔砭鸵蛞瓘U食?？寺〖夹g(shù)確實(shí)可能和原子能技術(shù)一樣，既能造福人類，也可禍害無窮。一方面，它能給人類帶來許多益處。諸如保持優(yōu)良品種、挽救瀕危動物

2、、利用克隆動物相同的基因背景進(jìn)行生物醫(yī)學(xué)研究等；另一方面，它將對生物多樣性提出挑戰(zhàn)。生物多樣性是門然進(jìn)化的結(jié)杲,也是進(jìn)化的動力，有性繁殖是形成生物多樣性的重要基礎(chǔ)，而“克隆動物”則會導(dǎo)致生物詁系減少，個(gè)體生存能力下降。1.1克隆與克隆技術(shù)的概述克隆一詞是英文單詞clone的音譯，作為名詞，clone通常被意譯為無性繁殖系。同一克隆內(nèi)所冇成員的遺傳構(gòu)成是完全相同的，例外僅見于冇突變發(fā)生時(shí)。口然界早已存在天然植物、動物和微生物的克隆，例如：同卵雙胞胎實(shí)際上就是一種克隆。然而，天然的哺乳動物克隆的發(fā)生率極低，成員數(shù)目太少（-?般為兩個(gè)），且缺乏口的性，所以很少能夠被用來為人類造福，因此，人

3、們開始探索用人工的方法來生產(chǎn)高等動物克隆。這樣，克隆一詞就開始被用作動詞，指人工培育克隆動物這一動作。克隆技術(shù)即無性繁殖技術(shù)。通常的有性生殖是由雌雄交配，精了和卵了結(jié)合發(fā)育成胚胎，經(jīng)妊娠后產(chǎn)岀新的個(gè)體?？寺〖夹g(shù)不需要雌雄交配，不需要精子和卵子的結(jié)合，只需從動物身上提取一個(gè)單細(xì)胞，用人工的方法將其培養(yǎng)成胚胎，再將胚胎植入雌性動物體內(nèi)，就可孕育出新的個(gè)體。這種以單細(xì)胞培養(yǎng)出來的克隆動物，具冇與單細(xì)胞供體完全相同的特征，是單細(xì)胞供體的“復(fù)制品二1.2DNA克隆技術(shù)應(yīng)用酶學(xué)的方法，在休外將各種來源的遺傳物質(zhì)——同源或異源、原核或真核、天然或人工的DNA與載體DNA相結(jié)合成一具冇自我復(fù)制能力的

4、DNA分子——復(fù)制了，繼而通過轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞、篩選出含有目的基因的轉(zhuǎn)化了細(xì)胞,再進(jìn)行擴(kuò)壇、提取獲得大量同一DNA分子，即DNA克隆.1.3生物體的克隆1.3.1植物體的克隆植物的繁殖分為有性繁殖和無性繁殖，有性植物克隆繁殖是通過種子進(jìn)行繁殖的，I佃無性繁殖是通過營養(yǎng)體進(jìn)行繁殖的，如：打插、嫁接、分株、壓條、組織培養(yǎng)等等都是無性繁殖。兩者在遺傳基礎(chǔ)上有較大的區(qū)別，采用種了播種具有較人的的遺傳變異性，而無性繁殖具冇較為穩(wěn)定的遺傳基礎(chǔ)，是營養(yǎng)體的繼續(xù)分化和生長，性狀穩(wěn)定。對于經(jīng)濟(jì)植物大多數(shù)采用無性繁殖技術(shù)進(jìn)行繁殖。因?yàn)樵谵r(nóng)業(yè)牛產(chǎn)上，我們需要的是性狀一致高質(zhì)量的有價(jià)值的種苗。植物克隆技術(shù)

5、它就是利用植物體的營養(yǎng)器官進(jìn)行繁育的，屈于無性快繁技術(shù)范疇，也是一種基于細(xì)胞全能性與植物的全息性的育苗技術(shù)。1.3.2動物體的克?、佟岸嗬钡恼Q生1997年2月27口英國愛丁堡羅斯林（Roslin）研究所的伊恩?維爾莫特科學(xué)研究小組向世界宣布，世界上第一頭克隆綿羊“多利"（Dolly）誕生，這一消息立刻轟動了全世界?！岸嗬颉钡漠a(chǎn)生與三只母羊有關(guān)。一只是懷孕三個(gè)刀的芬蘭多塞特母綿羊，兩只是蘇格蘭黑面母綿羊。芬蘭多塞特母綿羊提供了全套遺傳信息，即捉供了細(xì)胞核（稱Z為供體）；一只蘇格蘭黑而母綿羊捉供無細(xì)胞核的卵細(xì)胞；另一只蘇格蘭黑面母綿羊提供羊胚胎的發(fā)育環(huán)境一一了宮，是“多莉”羊的“生”母

6、。其整個(gè)克隆過程簡述如下：從芬蘭多塞特母綿羊的乳腺屮取出乳腺細(xì)胞，將其放入低濃度的營養(yǎng)培養(yǎng)液中，細(xì)胞逐漸停止了分裂，此細(xì)胞稱之為供體細(xì)胞；給一頭蘇格蘭黑面母綿羊注射促性腺素，促使它排卵，取出未受精的卵細(xì)胞，并立即將其細(xì)胞核除去，留下一個(gè)無核的卵細(xì)胞，此細(xì)胞稱Z為受體細(xì)胞；利用電脈沖的方法，使供體細(xì)胞和受體細(xì)胞發(fā)生融合，最后形成了融合細(xì)胞，出于屯脈沖還可以產(chǎn)生類似于自然受精過程屮的一系列反應(yīng)，使融合細(xì)胞也能象受精卵一樣進(jìn)行細(xì)胞分裂、分化，從而形成胚胎細(xì)胞；將胚胎細(xì)胞轉(zhuǎn)移到另一只蘇格蘭黑面母綿羊的子宮內(nèi)，胚胎細(xì)胞進(jìn)一步分化和發(fā)育，最后形成一只小綿羊。岀生的“多莉”小綿羊與多塞特母綿羊具有

7、完全相同的外貌。一年以后，另一組科學(xué)家報(bào)道了將小鼠卵丘細(xì)胞（圍繞在卵母細(xì)胞外周的高度分化細(xì)胞）的細(xì)胞核移植到去除了細(xì)胞核的卵母細(xì)胞屮得到20多只發(fā)育完全的小鼠。如呆“多利”因?yàn)橹挥幸恢?，還不夠叫做克隆羊的話，這些小鼠就是名副英實(shí)的克隆鼠了。②通過細(xì)胞核移植克隆小鼠的基木過程在木實(shí)驗(yàn)中，卵丘細(xì)胞是經(jīng)如下過程得到的：通過連續(xù)幾次注射絨毛膜促性腺激索，使雌鼠誘導(dǎo)成高產(chǎn)卵量狀態(tài)。然后從雌鼠輸卵管屮收集卵丘細(xì)胞與卵母細(xì)胞的復(fù)合體。經(jīng)透明質(zhì)酸處理使卵丘細(xì)胞散開。選擇直