《牛支原體滅活疫苗佐劑的篩選與培養(yǎng)基的改良》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、牛支原體滅活疫苗佐劑的篩選與培養(yǎng)基的改良分類號：密級：學(xué)號：2010108049單位代碼：10759石河子大學(xué)碩士學(xué)位論文牛支原體滅活疫苗佐劑的篩選與培養(yǎng)基的改良學(xué)位申請人石剛指導(dǎo)教師剡根強教授申請學(xué)位門類級別農(nóng)學(xué)碩士學(xué)科、專業(yè)名稱預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向動物傳染病診斷與防治所在學(xué)院動物科技學(xué)院中國·新疆·石河子2013年6月ScreeningadjuvantfortheinactivatedvaccineofMycoplasmabovisandtheimprovementofMycoplasmabovismediumI牛支原體滅活疫苗佐劑的篩選與培養(yǎng)基的改良ADissertation

2、SubmittedtoShiheziUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofAgricultureByShiGang(PreventiveVeterinaryMedicine)DissertationSupervisor:Prof.YanGen-qiangJune,2013II牛支原體滅活疫苗佐劑的篩選與培養(yǎng)基的改良摘要III牛支原體滅活疫苗佐劑的篩選與培養(yǎng)基的改良牛支原體(Mycoplasmabovis，M.bovis)是引起犢牛肺炎、關(guān)節(jié)炎和奶牛乳房炎的主要病原體，近年來，由牛支

3、原體感染引起的相關(guān)疾病已蔓延至全世界，2010年以來，新疆北疆部分地區(qū)規(guī)?；鰻倥ｊ懤m(xù)出現(xiàn)嚴重的肺炎與關(guān)節(jié)炎，造成大批犢牛死亡，后經(jīng)實驗室診斷確定病原體為牛支原體。目前，國內(nèi)尚無預(yù)防該病的商品化疫苗供生產(chǎn)應(yīng)用，而抗生素治療常存在盲目用藥，療效不確定等情況。為了解決上述問題本試驗著重開展了以下研究：1.將分離并鑒定得到的牛支原體新疆分離菌株進行擴大培養(yǎng)制備滅活菌懸液，然后分別與弗氏完全佐劑、白油佐劑、氫氧化鋁佐劑、蜂膠佐劑配合，制成滅活疫苗免疫小鼠，通過測定血清中的抗體水平來篩選免疫效果較好的疫苗佐劑。結(jié)果表明白油佐劑組的免疫增強效果最佳，產(chǎn)生的抗體水平最高，并且高抗體水平持續(xù)時

4、間較長，可以作為牛支原體滅活疫苗的較理想佐劑。2.在常用牛心湯培養(yǎng)基基礎(chǔ)上進行了改良，將配方中原有牛心湯進行了2倍濃縮并加入了DMEM和牛肺消化液，利用活菌計數(shù)法、菌體蛋白測定法、OD值測定法對牛支原體新疆分離株在改良后的液體培養(yǎng)基中不同培養(yǎng)階段的生長滴度即顏色變化單位（CCU）、菌體蛋白量及OD值進行了測定，并采用平板菌落計數(shù)法（CFU）對牛支原體新疆分離株在三種固體培養(yǎng)基中的菌落數(shù)進行了測定。結(jié)果表明改良后的培養(yǎng)基配方培養(yǎng)效率明顯提高，有助于牛支原體的大量培養(yǎng)。3.選擇臨床常用的恩諾沙星、乳酸環(huán)丙沙星、鹽酸林可霉素、泰樂菌素、阿奇霉素、替米考星、氧氟沙星、氟苯尼考八種藥物，采

5、用兩倍稀釋法對牛支原體進行體外最小抑菌濃度的測定，為指導(dǎo)臨床合理用藥提供依據(jù)。結(jié)果表明牛支原體對恩諾沙星的耐藥性最低，適用于當前治療牛支原體感染性疾病。關(guān)鍵詞：牛支原體；疫苗佐劑；ELISA；改良培養(yǎng)基；最小抑菌濃度（MIC）AbstractMycoplasmabovis(M.bovis)isanimportantcauseofpneumoniaandarthritisinyoungcalves,andmastitis.Inrecentyears,thecattlediseasecausedbyM.bovishasspreadwidelytoallpartsoftheworld.

6、Since2010,insomeareasoftheNorthofXinjianglarge-scaledairycalvessuccessivelybrokeoutseverepneumoniaandarthritisthatresultedinthedeathsofmorethan10calves.ThelaboratorydiagnosisconfirmedpathogenwasMycoplasmabovis.Atpresent,therewerenovaccinesforpreventionandcontrolofMycoplasmabovisdiseaseinourco

7、untry,onceoutbreaksofdiseaserelyingmainlyonantibiotictreatment.Butnowtherearewidevarietyofantibiotic,blindmedicationandbadtreatment.Inordertosolvetheaboveproblems,theIV牛支原體滅活疫苗佐劑的篩選與培養(yǎng)基的改良experimenthasfocusedonthefollowingresearch:1．Toevaluat