《erk2及il-10在播散性念珠菌病小鼠腎臟中的表達(dá)及意義》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文ERK2及IL--10在播散性念珠菌病小鼠腎臟中的表達(dá)及意義姓名：史爍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：皮膚病與性病學(xué)指導(dǎo)教師：佟盼琢201203中文摘要ERK2及IL．10在播散性念珠菌病小鼠腎臟中的表達(dá)及意義摘要目的：細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(ERK)是絲裂源活化蛋白激酶(MAPK)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的家族成員之一，參與介導(dǎo)細(xì)胞生長(zhǎng)，發(fā)育，分化，凋亡等一系列生理過程。國外文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)，已通過小鼠模型證實(shí)ERK轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)的核心通路。國內(nèi)研究證實(shí)，ERK可誘導(dǎo)TH2分化，ERK在免疫調(diào)節(jié)機(jī)制中起著至關(guān)重要的作用。目前有關(guān)ERK與疾病的關(guān)系的研究已在腫瘤、糖尿病腎病、艾

2、滋病等領(lǐng)域開展，但目前國內(nèi)外尚缺少有關(guān)ERK通路在播散性念珠菌病腎臟中的表達(dá)的報(bào)導(dǎo)。IL．10是TH2細(xì)胞分泌的一種細(xì)胞因子，是天然免疫反應(yīng)中重要的負(fù)調(diào)節(jié)因子。近年來，天然免疫和特異性免疫在播散性念珠菌病的發(fā)病中的作用日益受到人們的重視。本研究通過建立播散性白念珠菌病感染小鼠動(dòng)物模型，采用免疫組織化學(xué)染色方法來檢測(cè)不同感染時(shí)間EIⅨ2和IL．10在小鼠腎臟的表達(dá)情況并同時(shí)對(duì)二者在本疾病中的表達(dá)情況進(jìn)行相關(guān)性研究，探討其在播散性念珠菌病中可能的發(fā)病機(jī)制，為臨床治療播散性念珠菌病提供新的思路和方法。方法：1菌株白念珠菌來源于河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院皮膚性病科真菌室保存菌種。2播散性念珠

3、菌病小鼠模型的建立昆明小鼠90只，雌雄各半，體重259左右，購買于河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物飼養(yǎng)中心。適應(yīng)環(huán)境后，按體重隨機(jī)分為A、B、C三組，每組各30只。A組小鼠為實(shí)驗(yàn)組：于第1天經(jīng)腹腔注射環(huán)磷酰胺200mg／kg·d，連續(xù)4天，第5天時(shí)，經(jīng)腹腔注射濃度為1～5×106cfu／ml白念珠菌菌懸液lml／只，共1天，B組為環(huán)磷酰胺對(duì)照組：于第1天經(jīng)腹腔注射同等量環(huán)磷酰胺，連續(xù)4天，第5天再經(jīng)腹腔注射生理鹽水lml／只，共l天；C組為空白對(duì)照組：于第l天開始經(jīng)腹腔注射等量生理鹽水，連續(xù)5天。于實(shí)驗(yàn)第6d、第9d、第20d分批斷頸處死小鼠，并觀察腹腔臟器大體情況。中文摘要3播散性念珠菌感染

4、小鼠腎臟念珠菌的分離、鑒定無菌條件下取出小鼠腎臟，無菌生理鹽水沖洗數(shù)次后，將小鼠一側(cè)1／2腎組織研磨后，接種于沙氏培養(yǎng)基上培養(yǎng)。4組織病理學(xué)檢查及免疫組化另一部分腎組織用10％福爾馬林溶液固定，做常規(guī)病理HE染色及PAS染色觀察小鼠腎臟組織病理變化及白念珠菌感染情況。采用免疫組織化學(xué)鏈霉菌抗生素蛋白．過氧化物酶連接法(SP)檢測(cè)ERK2和IL．10的表達(dá)情況。結(jié)果：1播散性念珠菌感染小鼠模型的建立實(shí)驗(yàn)過程中，小鼠由于免疫抑制劑環(huán)磷酰胺造成多臟器出血、水腫死亡共lO只；由白念珠菌播散感染死亡共11只；不明原因死亡共15只。最終，納入實(shí)驗(yàn)小鼠共54只。A組小鼠實(shí)驗(yàn)第6d，經(jīng)解剖小鼠

5、腹腔內(nèi)部分臟器水腫明顯，未見白色膿點(diǎn)形成；實(shí)驗(yàn)第9d，經(jīng)解剖腹腔內(nèi)各臟器均可見大量白色膿點(diǎn)生成；第20d，解剖小鼠腹腔內(nèi)各臟器均可見大量白色膿點(diǎn)生成，部分臟器充血、壞死。B組小鼠于實(shí)驗(yàn)第6d，經(jīng)解剖腹腔內(nèi)臟器部分水腫、充血；實(shí)驗(yàn)第9d經(jīng)解剖后，腹腔內(nèi)臟器部分水腫、充血、壞死，無白色膿點(diǎn)形成；實(shí)驗(yàn)第20d，小鼠體重較前有所增加，精神、食欲稍差，毛發(fā)光澤恢復(fù)，活動(dòng)正常，經(jīng)解剖后，可見脾臟腫大明顯，肝臟稍充血，腎臟水腫。C組小鼠精神、食欲無變化，毛發(fā)光澤好，活動(dòng)正常。在實(shí)驗(yàn)第6d、第9d、第20d經(jīng)解剖后，腹腔內(nèi)臟器均呈正常表現(xiàn)。2播散性念珠菌感染小鼠體內(nèi)腎臟白念珠菌的分離、鑒定實(shí)驗(yàn)

6、組小鼠腎臟第6d、第9d、第20d在沙氏培養(yǎng)基上培養(yǎng)72小時(shí)，均可見白色菌落生長(zhǎng)，經(jīng)血清培養(yǎng)法鑒定為白念珠菌。3病理組織學(xué)檢查A組小鼠，實(shí)驗(yàn)第6d，鏡下可見正常腎小管和腎小球結(jié)構(gòu)，腎小管胞漿紅染變性；第9d，鏡下可見腎小管細(xì)胞核固縮，胞漿紅染，出現(xiàn)退行性改變，PAS染色可見紫紅色菌絲；第20d，可見腎小管部分壞死，核固縮，胞漿紅染，PAS染色腎小管和腎間質(zhì)內(nèi)可見紫紅色菌絲；B組小鼠，實(shí)驗(yàn)第6d、第9d及第20d，鏡下可見正常腎小管和腎小球結(jié)構(gòu)，腎小管胞漿紅染變性。C組小鼠鏡下均呈正常表現(xiàn)。ERK2蛋白水平表達(dá)情況：ERK主要在胞漿中表達(dá)，陽性細(xì)胞可見胞漿染成棕黃色；免疫組化染色

7、結(jié)果顯示，A、B、C組均可見陽性細(xì)胞表中文摘要達(dá)。在A組中實(shí)驗(yàn)第6d、第9d、第20dOD值分別為O．1882土0．0134，O．1962士0．0098，0．1878+0．0094；表達(dá)趨勢(shì)為先升高后下降，P>0．05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。B組中實(shí)驗(yàn)第6d、第9d、第20dOD值分別為O．1939士0．0165，O．19004-0．0250，0．18924-0．0173；表達(dá)趨勢(shì)為表達(dá)逐漸下降，P>0．05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。C組中實(shí)驗(yàn)第6d、第9d、第20dOD值分別為0．19854-0．0