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《陽離子脂質體為載體的基因體內遞送效果研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、陽離子脂質體為載體的基因體內遞送效果研究計:學位論文:43頁表格:8個插圖:14幅丁超指導教師:甄宇紅教授申請學位級別:碩士學位論文提交日期:2012年4月學位授予單位:大連醫(yī)科大學專業(yè)名稱:藥理學論文答辯日期:2012年5月學位授予日期:2012年6月評閱人:答辯委員會主席:獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得大連醫(yī)科大學或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所
2、做的任何貢獻均己在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名:—_二£鼴}一簽字日期:翌&年皇月4Et關于學位論文使用授權的說明《陽離子脂質體為載體的基因體內遞送效果研究》系本人在大連醫(yī)科大學攻讀(博士、碩士)學位期間在導師指導下完成的學位論文。本人及指導教師完全了解大連醫(yī)科大學關于保存、使用學位論文的規(guī)定,同意學校保留并向有關部門或機構送交學位論文的復印件和電子版本,允許論文被查閱和借閱,同意學校將本論文加入:1.中國學術期刊(光盤版)電子雜志社——《中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫》、《中國優(yōu)秀碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫》及CNKI相關數(shù)據(jù)庫。
3、2.中國科學技術信息研究所——《中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫》3.國家圖書館本人授權大連醫(yī)科大學,可以采用影印、縮印或其他復制手段保存、匯編學位論文,可以公布論文的全部或部分內容。論文作者簽名:指導教師簽名:簽字日期:]砭喲k翌I!年』月1日目錄一、摘要??????Oo·oODO00????????????????1(一)中文摘要??????????????????????1(二)英文摘要??????????????????????2二、正文??????????????????????????4(一)前言???????????????????????
4、?4(一)日!』舌?”??????????????????????’4(二)實驗部分.?????????????????????6第一章??????????????????????????6第二章??????????????????????????13(三)結論????????????????????????29(四)參考文獻??????????????????????30三、文獻綜述???????????????????????33(一)綜述????????????????????????33(二)參考文獻??????????????????
5、????39四、附錄?????????????????????????42五、致謝?????????????????????????43陽離子脂質體為載體的基因體內遞送效果研究碩士生姓名:專旨導教師:專業(yè)名稱:丁超甄宇紅教授藥理學摘要目的:考察自制的陽離子脂質體作為載體,在小鼠體內遞送DNA及RNA的效果及其體內安全性。方法:(1)以熒光素酶為目的基因,分別以自制的8種陽離子脂質體為載體,對攜帶熒光素酶基因的質粒pGFP-N2在小鼠體內進行轉染。通過WesternBlotting檢測轉染后小鼠肺和肝臟中熒光素酶的表達,評價陽離子脂質體在小鼠體內
6、遞送DNA的效果。(2)以自制的4種陽離子脂質體為載體轉染小鼠,對載脂蛋白B(ApoplipoproteinB,ApoB)進行體內RNA干擾。RT.PCR檢Nd,鼠肝臟中ApoBmRNA的表達,ELISA、WesternBlotting檢N4,鼠肝臟及血漿中ApoB蛋白的表達,評價陽離子脂質體在小鼠體內遞送siRNA的效果。(3)在進行體內轉染的同時通過考察小鼠的體重變化、內臟變化、死亡率等指標評價所用陽離子脂質體的體內安全性。結果:(1)以自制的8種陽離子脂質體9、10、17、19、20、21、22、CD01為載體進行體內DNA轉染,通過We
7、sternBlotting檢測到轉染組小鼠肝臟和肺中有熒光素酶蛋白的表達,表明所考察的陽離子脂質體均有體內遞送DNA的作用,且自制的陽離子脂質體和商品脂質體Lipofectamine2000效果相近。殼聚糖作為促進劑可以幫助脂質體在體內將質粒運送至靶器官和靶細胞。(2)分別以自制脂質體9、21、CTA、CPA為載體進行體內RNA干擾,通過WesternBlotting及RT—PCR的方法檢測到CTA及CPA干擾組的小鼠ApoB在mRNA及蛋白水平的表達明顯低于對照組,表明這兩種陽離子脂質體可在體內將siRNA遞送至靶部位并使其發(fā)揮基因沉默作用。
8、殼聚糖對RNA干擾效果有促進作用。(3)所考察的陽離子脂質體一基因復合物尾靜脈注射會對小鼠的健康狀態(tài)產(chǎn)生影響,與Lipofectamine2000市目