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1、臨床產(chǎn)ESBLs細(xì)菌流行病學(xué)及耐藥特性研究摘　要　目的：研究產(chǎn)超廣譜ß—內(nèi)酰胺酶(ESBLs)細(xì)菌流行情況及其對常用24種抗菌藥敏感性。方法：先后用頭孢硝噻吩及紙片擴(kuò)散初篩法、紙片擴(kuò)散確認(rèn)法從臨床分離的肺炎克雷伯菌及大腸埃希菌共289株中檢測出39株產(chǎn)ESBLs菌株，用微量稀釋法測定24種不同類抗生素對上述39株細(xì)菌的MIC值，用超聲破碎法及可見—紫外分光光度計分析比較ß—內(nèi)酰胺酶抑制劑舒巴坦、克拉維酸及他唑巴坦對ESBLs的抑制作用。結(jié)果：我院臨床分離肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBL5率為16．

2、7％、大腸埃希菌產(chǎn)ESBLs率為12，4％。產(chǎn)ESBLs細(xì)菌對青霉素類及三代頭孢菌素類耐藥率均較高，它們對氨芐西林、阿莫西林、頭孢哌酮、替卡西林、哌拉西林及美洛西林的耐藥率分別為：大腸埃希菌，100％，100％，100％，100％，96，3％和81．5％；肺炎克雷伯菌，100％，100％，91．67％，91．6了％，83．33％和75％．加用酶抑制劑后能顯著降低上述抗生素的耐藥率，它們對阿莫西林十克拉維酸、替卡西林十克拉維酸，氨芐西林十舒巴坦、頭孢哌酮十舒巴坦、哌拉西林十他唑巴坦和美洛西林十舒巴坦的耐藥率為：大

3、腸埃希菌，89.89％，55.5％，48.1％，3.7％，0％和0％；肺炎克雷伯菌，58.35％，16.67％，50．02％，0％，8．37％，和8．33％．這些細(xì)菌同樣表現(xiàn)出對磺胺類、喹諾酮類及第四代頭孢菌素有較高的耐藥率，它們對復(fù)方磺胺、環(huán)丙沙星及頭孢吡肟的耐藥率分別為：肺炎克雷伯菌，77．8％，74．1％和18．6％；大腸埃希菌，50％，16.67％和25％。但它們對阿米卡星的耐藥率為：肺炎克雷伯菌7．4％和大腸埃希菌25％，與第四代頭抱菌素類似有較低的耐藥率；而非典型ß—內(nèi)酰胺類抗生素頭孢西

4、丁、頭孢美唑及拉氧頭孢對產(chǎn)ESBLs菌株表現(xiàn)出相當(dāng)高的敏感率，大腸埃希氏菌分別為，100％，100％和100％；肺炎克雷伯菌分別為，83．43％，75％和91．67％．對于所有的受試菌株碳青霉烯類的伊米培能和美羅培南表現(xiàn)了最高的敏感率未發(fā)現(xiàn)耐藥菌株。ESBLs對單獨(dú)頭孢哌酮的水解率為43．93％，而當(dāng)結(jié)合了舒巴坦時對頭孢哌酮的水解率下降為20．91％，而當(dāng)結(jié)合了克拉維酸時為18．13％；而當(dāng)結(jié)合了他唑巴坦時為15．27％。結(jié)論：產(chǎn)ESBLs細(xì)菌對青霉素、頭孢菌素類耐藥率較高，并對不同類抗菌素有多重耐藥的特點(diǎn)。它

5、們對頭霉素類及氧頭孢烯類表現(xiàn)出相當(dāng)高的敏感率；碳青霉烯類仍然是對產(chǎn)ESBLs細(xì)菌最有效的藥物。酶抑制劑對產(chǎn)ESBLs細(xì)菌的體外效果以頭孢哌酮為共同底物的情況下為他唑巴坦略優(yōu)于克拉維酸，但二藥都強(qiáng)于舒巴坦。關(guān)鍵詞　超廣譜ß—內(nèi)酰胺酶(ESBLs)　耐藥性　　細(xì)菌產(chǎn)ß—內(nèi)酰胺酶是其耐藥的主要機(jī)制，而由質(zhì)粒介導(dǎo)的超廣譜ß—內(nèi)酰胺酶(ESBLs)是對新一代ß—9內(nèi)酰胺類抗生素耐藥的主要原因。ESBs由質(zhì)粒介導(dǎo)，易在同種屬甚至不同種屬細(xì)菌間傳遞造成暴發(fā)流行，國外已有多起暴發(fā)

6、流行的報道[1、2]ESBLs的出現(xiàn)給臨床抗感染治療帶來眾多問題：死亡率增高、住院時間延長、治療經(jīng)費(fèi)上升、醫(yī)生的治療選擇越來越少等等。ESBLs在國內(nèi)外已引起廣泛重視，但由于ESBLs檢測困難及費(fèi)用較高，一些檢測方法尚無法在臨床統(tǒng)一推廣，對ESBLs分布及流行的專門研究尚很少。隨著新型抗生素的臨床應(yīng)用增多，更加需要對這些抗生素與ESBLs之間的關(guān)系進(jìn)行研究．本實(shí)驗(yàn)以我院臨床分離的菌株為對象，采用NCCCLS承認(rèn)的方法檢測產(chǎn)ESBLs細(xì)菌的情況從而了解產(chǎn)ESBLs細(xì)菌的流行分布，在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步探討各類抗生素、酶

7、抑制劑等和產(chǎn)ESBLs細(xì)菌的相互作用關(guān)系，以期對臨床預(yù)防、治療產(chǎn)ESBLs細(xì)菌及合理應(yīng)用抗生素提出指導(dǎo)。材料和方法1　材料1．1　菌　株　　我院1999年3月至11月間住院病人臨床分離的來自血液、尿液、痰、膽汁、咽拭子、穿刺液、分泌液、膿汁及傷口引流液的289株細(xì)菌，其中包括肺炎克雷伯桿菌(217株)，大腸埃希菌(72株)，全部經(jīng)常規(guī)方法和法國生物梅里埃公司Vitek—30型機(jī)器鑒定。質(zhì)控菌株：大腸埃希菌ATCC25922；綠膿桿菌ATCC27853；標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)TEM4、SHV3、SHV5大腸埃希菌(美國IoWA大

8、學(xué)抗感染研究中心)。1．2　試劑及試紙　　藥敏紙片(北京天壇藥物生物技術(shù)開發(fā)公司)：奧格門汀(阿莫西林30μg／克拉維酸10μg／片)，頭孢他啶(30μg／片)，頭孢三嗪(30μg／片)，頭孢噻肟(30μg／片)，氨曲南(30μg／片)。藥敏紙片(天津金章醫(yī)用新技術(shù)研究所)：頭孢他啶(30μg／m1)頭孢他啶(30μg／m1)十克拉維酸(10μg／m1)；頭孢噻肟(30μg／m1)／頭