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1、豬圓環(huán)病毒病研究進(jìn)展豬圓環(huán)病毒病研究進(jìn)展疫病防治楊曉天江岸林黃江峰(廣西柳州武宣種畜場545905)李紀(jì)春(廣西柳州市動物疫病預(yù)防控制中心545005)豬圓環(huán)病毒病(Porcinecircovirusassociateddisease.PCVAD)主要是由豬網(wǎng)環(huán)病毒2型(Porcinecircovirustype2)引起的斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合癥(Post—weaningmuhisystemicwat—ingsyndrome,PMWS)以及其他相關(guān)疾病.感染圓環(huán)病毒的豬生長緩慢,飼料報(bào)酬率低.同時(shí)造成淋巴系統(tǒng)損

2、傷和免疫缺陷.引起其他疫病的大爆發(fā),給世界各國養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展造成了嚴(yán)重威脅和巨大的經(jīng)濟(jì)損失.1病原特征PCV屬圓環(huán)病毒科(Circovirdae)圓環(huán)病毒屬成員.為無囊膜的單股環(huán)狀負(fù)鏈DNA病毒,呈2O面體對稱,病毒粒子直徑約為17～20nm,是迄今發(fā)現(xiàn)最小的動物病毒之一.病毒以滾環(huán)方式復(fù)制,病毒粒子的浮密度為1.37g/era,沉降系數(shù)為52S.該病毒對外界環(huán)境的抵抗力較強(qiáng).70℃時(shí)可存活15min.56oC不能將其滅活,在pH3的酸性環(huán)境及氯仿可以存活較長時(shí)間.根據(jù)PCV抗原性及基因組成不同.將其分為兩種基因

3、型(或稱血清型),即PCV1及PCV2.PCV1是1974年首次從豬傳代細(xì)胞系PK一15中作為一種污染物分離出來的病毒[11.動物實(shí)驗(yàn)表明該病毒無致病性.可廣泛存在于正常豬體內(nèi)各組織器官.而PCV2是引起PMWS的主要病原.PCV1與PCV2的血清學(xué)交叉反應(yīng)有限.2流行病學(xué)PMWS在1991年首先發(fā)現(xiàn)于加拿大西部,隨后,美國,法國,北愛爾蘭,墨西哥等國也確認(rèn)了該病的存在.郎洪武等閉應(yīng)用EHSA法對我國7省(市)22個(gè)豬群559份豬血清樣品進(jìn)行檢測.總陽性率達(dá)42.9%.表明我國豬群中存在PCV2感染.PCV2可

4、經(jīng)口腔,呼吸道等途徑感染不同年齡的豬.感染母豬體內(nèi)的病毒亦可經(jīng)胎盤垂直感染仔豬.病豬或帶毒豬可以通過糞便,分泌物將病毒排}}j,造成病毒在豬群中的蔓延和擴(kuò)散.PCV2主要易感動物是豬.但Tis—cher等131應(yīng)用EUSA和間接免疫熒光試驗(yàn)(IIF)檢測發(fā)現(xiàn):在人,牛和鼠血清中也存在能與PCV發(fā)生群特異性結(jié)合的低水平抗體.3致病機(jī)理Rosell等研究發(fā)現(xiàn).PCV2從豬的鼻,口腔侵入體內(nèi).在扁桃體,局部淋巴結(jié)增殖后.向其他淋巴組織,肺,肝,腎擴(kuò)散.受慢性感染的影響,誘發(fā)免疫抑制,腸炎,問質(zhì)性腎炎及肝損傷.MeNe

5、illy等研究了PCV感染對豬肺巨噬細(xì)胞體外免疫功能的影響,結(jié)果發(fā)現(xiàn)PCV感染對抗體Fc和補(bǔ)體受體或吞噬作用無任何影響.但他們觀察到PCV感染4d對細(xì)胞MHC—I類抗原的表達(dá)有上調(diào)作用.而感染后8d可降低細(xì)胞MHC一Ⅱ類抗原的表達(dá).并且對巨噬細(xì)胞介導(dǎo)的,分裂素誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞增生有明顯抑制作用.Shiba—har等證實(shí)PCV誘導(dǎo)了淋巴系統(tǒng)中B細(xì)胞凋亡,使患豬處于免疫抑制狀態(tài).Krakowka等研究表明,PMWS癥狀的出現(xiàn)不僅需要PCV2,而且PPV也具有重要的作用.PMWS和PRRS具有很多相似的病理變化.豬的皮

6、炎與腎病綜合癥(PDNS)與PCV感染有一定相關(guān)性;在PCV2感染豬群中,很容易發(fā)生副豬嗜血桿菌等細(xì)菌的繼發(fā)感染.Segales等閣用流式細(xì)胞計(jì)數(shù)器分析感染豬外周血液中自細(xì)胞變化.發(fā)現(xiàn)單核細(xì)胞增加,T淋巴細(xì)f主要是CD4+1r和B淋巴細(xì)胞減少.不成熟粒細(xì)胞的密度偏低.以上表明.PCV引起了淋巴細(xì)胞凋亡,APC遞呈抗原能力的減弱,同時(shí)降低了B淋巴細(xì)胞和CD4CF細(xì)胞的機(jī)能.因此使患者豬處于免疫抑制狀態(tài),導(dǎo)致患豬抵抗力下降.4診斷方法首先,根據(jù)臨床癥狀和病理剖檢變化進(jìn)行初步診斷.但PCV2感染的臨床癥狀和其它疾病難

7、以區(qū)分.因此必須結(jié)合實(shí)驗(yàn)室診斷方法才能確診.無PCV1污染的豬腎細(xì)胞系(PK15)可用于PCV2病毒的分離培養(yǎng),但PCV2在培養(yǎng)細(xì)胞中不產(chǎn)生細(xì)胞病變.因此通常采用免疫學(xué)或分子生物學(xué)技術(shù)來確定pCV2存在.4.1間接免疫熒光試驗(yàn)(Indirectimmunofluorescenceassay,IIF)蘆銀華等[61用PK一15細(xì)胞增殖豬PCV2制備抗原建立的檢測PCV抗體的間接免疫熒光試驗(yàn)對64份臨床血樣進(jìn)行檢測.結(jié)果38份呈現(xiàn)抗體陽性(59%).4.2免疫過氧化物酶單層細(xì)胞試驗(yàn)(Immunoperoxidase

8、monolayerassay,IpMA)該方法原理與間接免疫熒光相同,只是檢測指示系統(tǒng)不同.IIF應(yīng)用熒光標(biāo)記的二抗進(jìn)行,而IPMA則采用酶標(biāo)顯色系統(tǒng)來進(jìn)行,劉長明等同建立了PCV2一IPMA方法.特異性及敏感性均較好.可以用于實(shí)驗(yàn)室PCV2抗原和血清抗體的檢測.IPMA是一種比較實(shí)用的方法.非特異性反應(yīng)低于間接免疫熒光.也不需要熒光顯微鏡.只需要普通的倒置顯微鏡即可,結(jié)果保存時(shí)間長.