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《紅車軸草總異黃酮粉劑中總異黃酮含量測(cè)定研究論文》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、紅車軸草總異黃酮粉劑中總異黃酮含量測(cè)定研究論文朱賢森黃志勤楊慶春齊來(lái)【摘要】目的建立紅車軸草總異黃酮粉劑中總異黃酮含量的測(cè)定方法,從而對(duì)該品進(jìn)行質(zhì)量控制。方法采用紫外分光光度法直接測(cè)定粉劑中總異黃酮含量,測(cè)定波長(zhǎng)為250nm。結(jié)果回歸方程為:Y=0.1312X+0.0095,相關(guān)系數(shù)r=0.9997,平均回收率為98.3%,RSD為2.06%,線性范圍為1.0040~5.0200mg/ml。結(jié)論紫外分光光度法測(cè)定該粉劑中總異黃酮含量結(jié)果準(zhǔn)確、方便、快捷、重現(xiàn)性好?!娟P(guān)鍵詞】紫外分光光度法紅車軸草粉劑總異黃酮Abstract:ObjectiveToestab
2、lishthedeterminationmethodofcontentofisoflavonesinTrifoliumpratenseFenjibyUVspectromertryandcontrolthequality.MethodsThecontentofisoflavonesinedbymeasuringtheUVabsorbanceat250nm..ResultsThelinearrelationshipg/ml.ConclusionItisspecific,accurate.freeleasuringthecontentofisoflavones.
3、Keyertry;TrifoliumpratenseFenji;Isoflavones;DeterminationofConcentration中藥紅車軸草TrifoliumpratenseL.為豆科車軸草屬多年生草本植物的干燥花序及帶花枝葉,又名紅三葉紅花苜蓿三葉草等[1],在我國(guó)大部分地區(qū)均有生產(chǎn),主要含有蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類、維生素和異黃酮等成分,其中異黃酮具有抗腫瘤(胃癌、乳腺癌)和治療骨質(zhì)疏松、更年期綜合征[2]、抑制前列腺癌和骨髓白血病細(xì)胞的生長(zhǎng)、改善動(dòng)脈血管的柔順性[3]等多種功能。隨著對(duì)研究的深入,目前國(guó)內(nèi)外科學(xué)家已從紅車軸草中發(fā)現(xiàn)了四十多
4、種異黃酮類化合物,主要是大豆黃素、染料木素、刺芒柄花素和鷹嘴豆芽素A等及其相應(yīng)的苷類。目前關(guān)于紅車軸草及其提取物中異黃酮報(bào)道較少,大多只測(cè)定了刺芒柄花素和鷹嘴豆芽素A。紅車軸草總異黃酮粉劑由中藥材紅車軸草經(jīng)現(xiàn)代制藥工藝提取、濃縮、干燥、粉碎而成。本文對(duì)該粉劑中總異黃酮的含量測(cè)定進(jìn)行了相關(guān)研究。1儀器與試藥紫外可見分光光度計(jì):UV2450PC(日本島津公司);紅車軸藥材購(gòu)自廣東清遠(yuǎn)藥材市場(chǎng),紅車軸草總異黃酮粉劑由實(shí)驗(yàn)室自制,芒柄花素對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供。甲醇(色譜純),水(重蒸水),其他試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2.1樣品的制備取紅車軸草藥材
5、,粉碎成粗粉,加85%甲醇浸泡2h后回流提取兩次,2h/次。將提取液吸入減壓濃縮罐中,減壓回收至相對(duì)密度1.05~1.10(50℃)。濃縮液冷卻后靜置分層,傾出上層藥液,下層沉淀待處理;上層藥液加5倍量水,攪拌30min后離心處理。離心后所得沉淀與上述濃縮液下層沉淀合并,加6倍量溶劑于室溫下脫脂3次,每次攪拌30min后靜置1h,吸除上層溶劑,下層脫脂沉淀物60℃真空干燥后用醋酸乙酯乙醇混合溶劑加熱回流提取2h,冷至室溫后濾過(guò),濾液減壓濃縮至所加混合溶劑體積的1/12,冷至室溫后再靜置8h,濾過(guò),沉淀物60℃真空干燥,粉碎,將樣品用甲醇配成適當(dāng)濃度溶液即
6、得。2.2測(cè)定方法的選擇根據(jù)化學(xué)成分研究結(jié)果,紅車軸草含有黃酮類成分、蛋白質(zhì)、糖類、脂溶性色素和少量的甾醇類等成分,本品經(jīng)純化后,主要含芒柄花素、鷹嘴豆芽素A等異黃酮類化合物及少量的脂溶性色素成分。這些異黃酮類化合物在紫外區(qū)具有很強(qiáng)的特征吸收,因此選擇紫外分光光度法測(cè)定本品總黃酮的含量。2.3對(duì)照品的選擇根據(jù)化學(xué)成分研究結(jié)果,芒柄花素(formonoin)是本品含量最高的成分,因此選擇芒柄花素作為本品含量測(cè)定的對(duì)照品。2.4測(cè)定波長(zhǎng)的選擇將樣品和芒柄花素對(duì)照品用甲醇配成適當(dāng)濃度,在200~400nm范圍內(nèi)掃描,兩者最大吸收波長(zhǎng)均在250nm,因此選擇250
7、nm作為本品的測(cè)定波長(zhǎng)。2.5線性關(guān)系和回歸方程精密稱取芒柄花素對(duì)照品10mg,置10ml量瓶中,加適量的甲醇溶解并稀釋至刻度。精密吸取該溶液0.5ml,置10ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,即得每毫升含0.05mg的芒柄花素對(duì)照品溶液。準(zhǔn)確吸取芒柄花素對(duì)照品溶液0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml,分別置于10ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,以甲醇為空白對(duì)照,于250nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收值。以吸收度為縱坐標(biāo),對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。其線性關(guān)系和回歸方程為:Y=0.1312X+0.0095,相關(guān)系數(shù)r=0.9997,線性范圍為1.0040~5.0
8、200mg/ml。2.6提取溶劑的選擇粉劑中所含的異黃酮類成分在甲