《小ERF轉錄因子參與調控擬南芥對ABA和鹽脅迫的響應.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。

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4、Ｖ，．乂＇，＇１Ｉ＇—＇＇＇：＇”：二、＞芭；乂，丫方方；．摘要乙烯(Ethylene)參與調控植物生長發(fā)育的多個方面，包括種子休眠的打破、幼苗生長調控、葉片脫落、花的開放及衰老和脫落、果實成熟、根瘤形成等；此外，乙烯也參與調控植物對病原菌侵染等生物脅迫，以及干旱、鹽堿等非生物脅迫的響應。ERFs(EthyleneResponseFactors)是植物中特有的轉錄因子，屬于AP2(APETALA2)/ERF超家族。ERF家族中有4個小ERF蛋白，分別是ERF95、ERF96、ERF97和ERF9

5、8，這些蛋白序列高度相似，具有與AtERF1等其它ERFs的羧基端序列高度相似的DNA結合域，還都具有一個功能未知的結構域CMIX-1，但它們均不具備AtERF1等其它ERFs所具有的N末端轉錄因子活性區(qū)域。已有研究報道ERF95和ERF98參與了植物對非生物脅迫響應的調控，而ERF96和ERF97參與了植物對生物脅迫響應的調控。本文中則系統地研究了小ERFs在調控擬南芥對ABA響應中的作用。利用蛋白的氨基酸全序列的系統發(fā)育樹分析結果顯示ERF95、ERF96和ERF97聚為一簇，而ERF98與它們三個的關系比較

6、遠。qRT-PCR結果顯示這些小ERFs的表達模式各不相同：ERF95、ERF97和ERF98在擬南芥植株的根、莖、葉、花以及成熟的種子中均有不同程度地表達，但ERF95在成熟的種子中表達量最高，ERF98在莖中表達量最高，而ERF97在花和種子中表達量都相對較高。ERF96也是在花和種子中表達量比較高，但在根中幾乎檢測不到ERF96的表達。蛋白亞細胞定位分析表明ERF95、ERF96、ERF97和ERF98均定位于細胞核中。葉肉細胞原生質體瞬時轉染實驗表明所有ERFs都具有轉錄激活活性，且EDLL基序是其轉錄激

7、活活性所必需的。盡管三突變體erf95erf96erf97和erf96erf97erf98，及四突變體erf95erf96erf97erf98都與野生型的表型近似，但小ERFs的過表達擬南芥植株呈現出明顯不同于野生型的表型。尤其是ERF95、ERF96和ERF98過表達擬南芥植株的蓮座葉大小與野生型存在極顯著的差異(p<0.01)，開花時間也明顯延遲(p<0.01)。ABA敏感性試驗結果顯示，擬南芥小ERFs過表達轉基因植株對ABA敏感性增強，特別是ERF95、ERF96和ERF98過表達轉基因植株，在ABA處理

8、后，無論發(fā)芽率、綠苗率還是根的長度均遠低于野生型。qRT-PCR結果表明，過表達ERFs轉基因植株中ABA響應基因ABI5、ABF3、ABF4、RD29A、P5CS和COR15A的表達水平在ABA處理時顯著高于Col野生型。生理實驗結果表明，小ERFs過表達轉基因植株失水速率顯著低于Col野生型，氣孔孔徑小于Col野生型，而植株的瞬時葉片水分利用效率則要高于Col野生型植